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胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)
更新時(shí)間:2019-01-10 點(diǎn)擊量:2189

胰蛋白-EDTA 溶液(0.05%:0.02%,含酚)

產(chǎn)介:

胰蛋白(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白原分泌到小后,小內(nèi)的腸肽 酶會活化該酶原,形成胰蛋白。胰蛋白的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白原,這種過程即自催化。胰蛋白在小工作,它會將蛋白質(zhì)水解為肽,進(jìn)而分解氨基酸,其適溫度約為 37℃Ø Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚)0.05%、0.02%EDTA、少量酚成,經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下 12min 左右就可以消化下大多數(shù)細(xì)胞。

產(chǎn)成:Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚) 100ml -20℃

材料:

1、 PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)

2

3、 離心機(jī)

操作步驟(供參考)

1細(xì)胞的消化

吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBSHanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。

加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.52min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

察,細(xì)胞明,并且肉眼察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明

化;或者用吹打細(xì)發(fā)現(xiàn)細(xì)好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

如果發(fā)現(xiàn)消化不足,加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。10002000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量

去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)

2、組織的消化

不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

注意事項(xiàng)

1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免失效。

2、在使用 Trypsin-EDTA solution 程中,要特注意避免消化液被細(xì)染。

3、Trypsin-EDTA solution 消化細(xì)時(shí)間不宜過長,否則細(xì)板后生狀況會差。

4、了您的安全和健康,穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期: 12 個月有效。

 

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